脫毒甘薯的生產(chǎn)過程包括優(yōu)良品種篩選、莖尖苗培育、病毒檢測(cè)、優(yōu)良莖尖苗株系評(píng)選、高級(jí)脫毒試管苗速繁、原原種、原種和良種種薯及種苗的繁殖等8個(gè)環(huán)節(jié)每個(gè)環(huán)節(jié)都有嚴(yán)格的要求，更終目的是保證各級(jí)種薯的質(zhì)量，充分發(fā)揮脫毒甘薯的增產(chǎn)潛力。
一、優(yōu)良品種選用
甘薯優(yōu)良品種很多，而且經(jīng)過脫毒后都能不同程度地提高產(chǎn)量、改善品質(zhì)。但甘薯品種都有一定的區(qū)域適應(yīng)性和生產(chǎn)實(shí)用性，在進(jìn)行甘薯脫毒時(shí)一定要根據(jù)本地區(qū)氣候、土壤和栽培條件，選用適合本地區(qū)大面積栽培的高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)品種或具有特殊用途的品種。例如，在城郊地區(qū)更好選用龍九、北京553、徐薯34、心香、西農(nóng)431等食用型品種，甘薯"淀粉"加工區(qū)應(yīng)選用SL-19、鄂薯6、豫薯12、豫薯13,徐薯22號(hào)等淀粉用品種。另外，特別需要注意的是，甘薯脫毒后只能去除體內(nèi)某些或某種病毒，其品種本身的抗病毒、抗莖線蟲病、抗根腐病等病蟲害能力并沒有太大改變。選用品種時(shí)，一定要考慮到品種本身的抗病蟲特性。
二、莖尖苗培育
病毒主要通過維管輸導(dǎo)組織傳播，莖尖分生組織未形成維管束，病毒主要通過細(xì)胞間連絲擴(kuò)散，傳播速度很慢。再者，莖尖分生組織新陳代謝活動(dòng)十分旺盛，生長(zhǎng)激素濃度較高，病毒的復(fù)制受到很大抑制，因此，莖尖頂部分生組織不帶或很少攜帶病毒。在無菌條件下切取甘薯莖尖分生組織，在特定的培養(yǎng)基上進(jìn)行離體培養(yǎng)，就能夠再生出可能不帶有病毒的莖尖脫毒苗。誘導(dǎo)莖尖苗的方法：選甘薯苗莖頂部3厘米長(zhǎng)的芽段，用70%酒精、3%漂白粉液分別消毒，在超凈工作臺(tái)內(nèi)解剖鏡下剝離莖尖。將剝離的長(zhǎng)0.2-0.5毫米(一般帶1-2個(gè)葉原基)的莖尖接種在附加1-2毫克每升6-BA的MS培養(yǎng)基上，26-28攝氏度下光培養(yǎng)，莖尖膨大變綠后轉(zhuǎn)入無激素的MS培養(yǎng)基上培養(yǎng)成莖尖試管苗。待苗長(zhǎng)至5-6片葉時(shí)移至營(yíng)養(yǎng)缽內(nèi)進(jìn)行病毒檢測(cè)。一般來講，從剝莖尖到誘導(dǎo)出5-7片葉的莖尖苗至少要用60-90天。利用分生組織培養(yǎng)誘導(dǎo)甘薯莖尖苗是甘薯脫毒的技術(shù)關(guān)鍵。
三、病毒檢測(cè)
莖尖分生組織培養(yǎng)得到的莖尖苗并不都是脫毒苗，只有部分苗不含病毒，是脫毒苗；莖尖苗必須經(jīng)過嚴(yán)格的病毒檢測(cè)確認(rèn)不帶病毒后廠才是脫毒莖尖苗。莖尖苗的檢測(cè)十般首先采取目測(cè)法淘汰弱苗和顯癥苗，然后再用血清學(xué)方法或分子生物學(xué)方法進(jìn)行篩選。經(jīng)血清學(xué)或分子生物學(xué)方法檢測(cè)呈陰性的樣品再進(jìn)行指示植物嫁接檢測(cè)。
四、優(yōu)良株系評(píng)選
甘薯的芽變率比較高，莖尖分生組織培養(yǎng)再生的莖尖苗株系間在形態(tài)和產(chǎn)量方面往往存在較大差異。因此,經(jīng)病毒檢測(cè)確認(rèn)的脫毒苗必須進(jìn)行優(yōu)良株系評(píng)選，淘汰變異株系，保留優(yōu)良株系。株系評(píng)選的方法是：將脫毒苗株系每系5-10株栽種到防蟲網(wǎng)室內(nèi)，以同品種普通帶毒薯為對(duì)照，進(jìn)行形態(tài)、長(zhǎng)勢(shì)、產(chǎn)量等多方面的觀察評(píng)定，選出若干既符合品種特性又高產(chǎn)的更優(yōu)株系，混合繁殖。
五、高級(jí)脫毒試管苗速繁
利用莖尖分生組織培養(yǎng)獲得脫毒苗后，要獲得大田生產(chǎn)利用的足夠脫毒苗，快速繁殖技術(shù)起著決定性作用。脫毒甘薯莖尖苗的大量繁殖，可以采用試管苗單葉節(jié)快繁或溫網(wǎng)棚繁殖2種方式來完成。二者在速度、成本等方面互有優(yōu)勢(shì)。
1、 脫毒苗試管快繁
脫毒苗試管快繁具有以下優(yōu)越性：①繁殖速度快。在合適的培養(yǎng)條件下(溫度25~28攝氏度，每天光照16小時(shí))，1個(gè)莖節(jié)45天內(nèi)即可長(zhǎng)成具5-6片葉的小植株，以繼代1次增殖5株計(jì)算，其繁殖系數(shù)為5n。②避免病毒再侵染。脫毒苗的試管快繁是在嚴(yán)格的無菌條件下進(jìn)行的，即沒有病毒源也沒有傳播媒介。③繼代繁殖成活率高。除極少數(shù)由于操作不慎造成試管苗污染外，單莖葉成苗率達(dá)100%。④不受季節(jié)、氣候和空間限制，可以進(jìn)行工廠化生產(chǎn)。目前脫毒苗快繁方法為固體培養(yǎng)，莖尖苗試管快繁培養(yǎng)基：一般采用不加任何激素的1／2培養(yǎng)基。
試驗(yàn)表明，全量MS培養(yǎng)基能夠給試管苗提供較充分的營(yíng)養(yǎng)成分，從而能夠保持試管苗較旺盛的生長(zhǎng)活是理想的培養(yǎng)基；但從試繁的角度看，在保證正常情況下，繁殖系數(shù)的高低主要取決于葉片數(shù)及株高2個(gè)指標(biāo)，l／2MS培養(yǎng)基中試管苗的生長(zhǎng)雖不及全量MS培養(yǎng)基中的旺盛，但上述2個(gè)指標(biāo)仍能達(dá)到快繁的要求，也為較理想的培養(yǎng)基。
2、MS的配制及培養(yǎng)基的配制方法
MS的配制分為大量元素、中微量元素、有機(jī)物類和鐵元四種藥劑，其配方為：
大量元素MS1：20倍
元素 | 化學(xué)式 | 配量《mg》 | 2L用量(mg) | 硝酸銨 |
| 1650*20=33000 | 66000 | 硝酸鉀 |
| 1900*20=38000 | 76000 | 二水氯化鈣
無水氯化鈣 |
| 440*20=8800
332.25*20=6645 | 17600
13290 | 七水硫酸鎂 |
| 370*20=7400 | 14800 | 磷酸二氫鉀 |
| 170*20=3400 | 6800 |
定容1000ml 取量50ml/L
中量元素MS2：100倍
元素 | 化學(xué)式 | 配量《mg》 | 備注 | 硼酸 |
| 6.2*100=620 |
| 四水硫酸錳 |
| 22.3*100=2230 |
| 七水硫酸鋅 |
| 8.6*100=860 |
| 二水鉬酸鈉 |
| 0.25*100=25 |
| 碘化鉀 | KI | 0.83*100=83 |
| 氯化鈷 | CoCL2.6H2O | 0.025 | 由于用量小不好稱重，故擴(kuò)大1000倍稱重，定容500ML，含量0.05mg/ml,取50ML | 硫酸銅 | CuSO4.5H2O | 0.025 |
定容1000ml 取10ml/l
MS3 100倍
| 元素 | 化學(xué)式 | 配量《mg》 | | 七水硫酸鐵 | FeSO4.7H2O | 27.8*100=2780 | | 乙二胺四乙酸二鈉 | EDTA | 37.3*100=3730 |
定容1000ML 取10ml/L (定容后需加熱至沸騰)
MS4 100倍
| 元素 | 化學(xué)式 | 配量《mg》 | | B1 |
| 0.4*100=40 | | B6 |
| 0.5*100=50 | | 煙酸 |
| 0.5*100=50 | | 甘氨酸 |
| 2.0*100=200 |
定容1000ml 取10ml/L
將配好的MS定容后裝入玻璃容量瓶中放冰箱中存放，待用。
培養(yǎng)基配制步驟：(配制1L)
1、取各ms混合+30g白砂糖溶解
2、調(diào)PH至5.8,偏堿用HCl,偏酸用NaoH.(1摩爾鹽酸：100ml蒸餾水加8.6mlHCL；1摩爾氫氧化鈉：100ml蒸餾水加4gNaOH)。
3、將加水約500ml的不銹鋼鍋加熱至沸后，加6g瓊脂粉的水溶液，不斷攪拌至沸騰。
4、將PH值調(diào)好的ms+白砂糖的溶液加入煮沸的瓊脂溶液中，停止加熱，加水定容1L，并不斷的攪拌至培養(yǎng)基均勻。
5、用液體分裝器分裝到培養(yǎng)瓶中，約50-60ml/瓶。后將無菌封口膜用橡皮筋封好。
6、把封好有培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶加入高溫滅菌箱中滅菌。（121攝氏度，滅菌20min）
7、在通過滅菌的培養(yǎng)基上進(jìn)行無菌甘薯苗的切段（每瓶接種3個(gè)莖段）、接種的快繁工作。
3、試管苗快繁的環(huán)境
試管苗快繁的光照條件：光照時(shí)間長(zhǎng)短對(duì)甘薯試管苗發(fā)育的意義，不僅在于莖葉形態(tài)發(fā)育的需要，而且對(duì)其生長(zhǎng)也有顯著影響。在暗培養(yǎng)條件下，甘薯脫毒苗節(jié)段有葉的分化及莖的伸長(zhǎng)，但呈黃化狀態(tài)，葉片不伸展或生長(zhǎng)，莖細(xì)弱。甘薯脫毒試管苗的株高、葉片數(shù)及鮮重隨光照時(shí)數(shù)的延長(zhǎng)而提高，延長(zhǎng)光照時(shí)數(shù)對(duì)試管苗莖葉的分化及生長(zhǎng)均為有利，較長(zhǎng)的光照有利于提高試管苗繁殖系數(shù)，獲得健壯的脫毒試管苗。另外，在不同的光照時(shí)數(shù)下，甘薯脫毒試管苗的平均節(jié)間長(zhǎng)度差異不顯著，因?yàn)樵嚬苊缜卸螢閱稳~節(jié)快繁，節(jié)間無須過長(zhǎng)，在一定的節(jié)間長(zhǎng)度下，葉片數(shù)增加，則繁殖系數(shù)呈幾何級(jí)數(shù)數(shù)增加。延長(zhǎng)光照時(shí)數(shù)，伴隨株高的增加，只增加葉片數(shù)而不顯著增加節(jié)間長(zhǎng)度，正適合于試管苗單葉節(jié)快繁的需要。目前在組培室中一般采用光照強(qiáng)度2000-3600lux,光照16h.
溫濕條件：據(jù)研究，甘薯試管苗在25-28攝氏度生長(zhǎng)做快，空氣濕度保持在75%即可。
將接種好的試管瓶移置于以上環(huán)境的組培室進(jìn)行培養(yǎng)45-60天，待脫毒苗5-6片葉，即可再次進(jìn)行在試管瓶的擴(kuò)繁，或移栽至蛭石營(yíng)養(yǎng)盤馴化。試管苗在蛭石營(yíng)養(yǎng)盤中的馴化方法為：首先將試管瓶上的無菌封膜去掉煉苗2-3天，再進(jìn)行移栽，可以提高試管苗的成活率，移栽時(shí)將試管苗的根部剪掉，移栽至含水合適的（手握蛭石成團(tuán)）蛭石盤中，株行距為5*5cm。在光照3600lux，溫度25-30攝氏度，空氣濕度在75%的環(huán)境下培養(yǎng)10天左右，待外界環(huán)境合適時(shí)，移栽至防蟲網(wǎng)棚進(jìn)行擴(kuò)繁，若外界環(huán)境不適合，還可在組培室中進(jìn)行蛭石的擴(kuò)繁。
4、高級(jí)脫毒苗田間快繁
①防蚜塑料大棚速繁。在3月中旬將5-7片葉的脫毒試管苗打開瓶口，室溫下加光照煉苗5-7天。栽前頭天下午在棚內(nèi)苗圃上撤上用100克40%樂果乳油加水2.5-5千克稀釋后與15-25千克干餌料拌成的毒餌，以消滅地下害蟲。然后按5厘米X5厘米株距栽種在覆蓋防蟲網(wǎng)的塑料大棚內(nèi)，澆足水后加蓋一層小弓棚，把溫度控制在25攝氏度左右。待苗長(zhǎng)至15-20厘米時(shí)剪下蔓頭繼續(xù)栽種、快繁。采用這種雙膜育苗方法繁殖系數(shù)可以達(dá)到100倍以上。但要注意小水勤澆，通風(fēng)透氣，保證溫度既不能低于10攝氏度，也不能高于30攝氏度。②防蚜網(wǎng)棚速繁。即在4月下旬或5月初將經(jīng)過鍛煉的5-7片葉的脫毒試管苗，按每畝10 000株的密度栽種在防蚜蟲大棚內(nèi)，勤施肥水，待苗長(zhǎng)至15厘米左右時(shí)摘心，促進(jìn)分枝。以后待分枝苗長(zhǎng)至5片葉時(shí)繼續(xù)剪苗栽種速繁，或直接用于繁殖原原種。 ③防蚜冬暖大棚越冬快繁。9月底10月初將脫毒試管苗移栽在外加40目防蟲網(wǎng)的冬暖式大棚內(nèi)。11月上旬蓋塑料膜，12月上、中旬加蓋草簾子，使棚內(nèi)溫度保持在10-30攝氏度。注意及時(shí)防治蚜蟲。到4月中、下旬采苗移至苗圃進(jìn)射擴(kuò)繁。這種方法脫毒苗在外暴露時(shí)間過長(zhǎng)，重新感染病毒的機(jī)會(huì)較大，一般用的較少。 需要特別強(qiáng)制的是，甘薯病毒主要靠桃蚜(Myzuspersicae)、棉蚜(Aphisgossipii)和蘿卜蚜(Lipaphis erysimi)以非持久方式進(jìn)行傳播。因此，無論采用何種速繁方法，都要切記采取隔離措施(40目防蚜網(wǎng)、500米以內(nèi)無普通帶毒甘薯空間隔離等)和定期噴灑防治蚜蟲的藥劑來防止蚜蟲傳毒再侵染。
六、原原種繁育
用高級(jí)脫毒試管苗在防蚜蟲網(wǎng)棚內(nèi)無病原土壤上生產(chǎn)的種薯即原原種。脫毒甘薯原原種的繁育要求非常嚴(yán)格：必須具備3個(gè)條件：第一，栽種的必須是高級(jí)脫毒試管苗。第二；必須要在防蟲網(wǎng)棚內(nèi)生產(chǎn)原原種。防蟲網(wǎng)棚是繁育原原種的重要條件之一，而且所用防蟲網(wǎng)的網(wǎng)眼必須在40目以上，這樣蚜蟲就不能通過；可以大大減少蚜蟲傳播病毒的機(jī)會(huì)。第三，所用地塊必須是無病原土壤，更好選用多年未栽種過甘薯的土壤。另外，還要經(jīng)常噴灑殺蟲藥劑，防治蚜蟲，以免產(chǎn)生病毒再侵染。這3個(gè)條件是繁殖原原種所必須具備的。使用原原種苗甚至原種苗栽種在防蟲網(wǎng)棚內(nèi)所生產(chǎn)的種薯，嚴(yán)格講不能算是原原種。
原原種繁殖在防蟲網(wǎng)棚內(nèi)進(jìn)行網(wǎng)棚內(nèi)光照較弱，通風(fēng)透氣性較差，很容易造成旺長(zhǎng)。因此，繁殖原原種時(shí)，栽插密度不易太高，一般以每畝4000株為宜。在管理方面應(yīng)注意少施氮肥，多施磷、鉀肥，注意控溫、控水、控濕，既要防止莖葉徒長(zhǎng)，又要促進(jìn)多結(jié)薯塊。如果脫毒甘薯長(zhǎng)勢(shì)偏旺，可采用提蔓方法或每666.7平方米用0.2千克磷酸二鉀對(duì)水50千克，葉面噴施2-3遍，促使薯塊膨大和地上部穩(wěn)長(zhǎng)。如果發(fā)生了徒長(zhǎng)，秧蔓深達(dá)40厘米以上，則可以使用打群頂或用75-150克多效唑?qū)λ?0-70千克葉面噴灑1-2次的辦法加以控制。
在繁殖原原種時(shí)，要始終貫穿防止病毒再侵染的意識(shí)。在網(wǎng)棚內(nèi)要種植一些指示植物，每1-2個(gè)星期噴灑1次防治蚜蟲的藥劑。防治蚜蟲的辦法有：1.5%樂果粉劑，按每畝1.5-2.5千克用量噴粉；49%樂果乳油1000-2000倍液，每畝50千克；50%敵敵畏1 500倍，每畝50千克；50%抗蚜威可濕性粉劑4000倍液，每畝50千克；20%殺滅菌酯或2.5%溴氰菌酯20毫升對(duì)水50千克噴霧；50%久效磷乳油2000-3000倍，每畝50千克。防蚜蟲時(shí)更好多種藥劑輪換使用，以免蚜蟲產(chǎn)生抗藥性，達(dá)不到防治效果。 原原種收獲時(shí)要逐株觀察是否有病毒癥狀，一旦發(fā)現(xiàn)病株要堅(jiān)決拔除，以確保原原種質(zhì)量。如果網(wǎng)棚內(nèi)所種植的指示植物表現(xiàn)病毒癥狀，整個(gè)棚內(nèi)所繁殖的種薯應(yīng)降級(jí)使用。
七、原種繁育
用原原種苗(即原原種種薯育出的薯苗)在500米以上空間隔離條件下生產(chǎn)的薯塊為原種。原種的繁殖必須用薯苗為原原種苗：必須具有500米內(nèi)無普通帶毒甘薯種植的空間隔離條件；必須所用田塊至少3年以上沒種過普通帶毒甘且為無病田。一般來講，原原種的數(shù)量比較少，而且價(jià)格比較貴。繁育原種時(shí)更好盡早育苗，以苗繁苗，以擴(kuò)大繁殖面積，降低生產(chǎn)成本。原原種苗快繁的方法有很多種，但以加溫育苗法、采苗圃育苗法和單、雙葉節(jié)繁殖法更為常用。
①加溫育苗法，又稱多級(jí)育苗法。在冬季或早春(2月上旬)利用火炕、電熱溫床、雙層塑料薄膜覆蓋溫床或加溫塑料大棚等提早排種，加強(qiáng)管理，促進(jìn)薯苗早發(fā)快長(zhǎng)。將原原種種薯消毒處理后排入苗床，排種時(shí)注意薯塊頂端向上，薯面處于同一平面，種薯薯塊平放。撤好串縫土、澆足床水后覆土蓋塑料薄膜。在育苗的頭一周內(nèi)，溫床溫度更好在37攝氏度左右，以后逐漸降至30-32攝氏度。千萬注意：如果排種到萌芽之間土壤溫度低于10攝氏度，即便時(shí)間只持續(xù)1天，也會(huì)造成凍害，導(dǎo)致薯塊腐爛，影響出苗。出苗后應(yīng)注意及時(shí)揭膜，避免燒苗。當(dāng)薯苗長(zhǎng)至12-18厘米、5-7片葉時(shí)剪苗，栽到另外的火炕或溫床內(nèi)成苗，再把先后兩級(jí)苗床的苗剪栽到覆蓋薄膜的冷床或大棚里繼續(xù)繁殖。待4月份氣溫上升至10攝氏度以上后再剪栽到采苗圃里育苗。
?、诓擅缙杂绶?。"朝陽溝"采苗圃：栽種行距40厘米，株距10厘米，定植密度為666.7平方米16000-20000株。采苗周東西向開溝，薯苗緊貼溝的北面栽種，苗尖不超過壟背。這種方法背風(fēng)向陽溫度高，有利于發(fā)根長(zhǎng)苗。小壟密植采苗圃：壟距50厘米，株距10厘米，定植密度13000株／666.7平方米。平畦采苗圃：做成1米寬小畦，澆足底墑，蓋好地膜。按15厘米X15厘米株行距插苗。定植密度666.7平方米30 000株左右。為促進(jìn)薯苗生長(zhǎng)，可以分次追施氮肥，適當(dāng)澆水。但采苗前幾天應(yīng)停止?jié)菜?，促進(jìn)薯苗健壯生長(zhǎng)，提高栽苗成活率。
③單、雙葉節(jié)繁殖法。把7-8個(gè)節(jié)的薯苗剪短成1葉1節(jié)或2葉2節(jié)的短苗栽種到采苗圃里，長(zhǎng)成5-7片葉的成苗時(shí)栽到原種繁殖田里。若用單葉節(jié)繁殖，每節(jié)上端要留短一些(不超過0.5厘米)，下端留長(zhǎng)些。更好上午剪苗下栽苗，栽后澆足窩水，第二天早晨再澆1次，蓋上一層土。繁殖期間應(yīng)加強(qiáng)田間管理，管理要細(xì)致，肥水應(yīng)及時(shí)，以便促使幼芽早出土。除采用500米以內(nèi)無普通帶毒甘薯種植的空間隔離辦法防止蚜蟲傳毒再侵染外，原種繁殖的其他生產(chǎn)條件和環(huán)境與普通甘薯生產(chǎn)基本相同。因此，原種繁殖田的栽培管理同普通甘薯基本一樣。但繁殖原種時(shí)栽插期不易過早，更好在6月下旬以后栽種。另外，脫毒甘薯莖葉生長(zhǎng)比較旺盛，要注意控水控肥，防止旺長(zhǎng)。原種繁殖時(shí)要密切注意防止病毒再侵染。繁殖田周圍500米內(nèi)不能有普通帶毒甘薯種植，所用田塊必須3年以上未種過普通帶毒甘薯，且無莖線蟲病、根腐病、黑斑病等。要在繁殖田內(nèi)種植一些指示植物，每15天定期噴灑防蚜蟲藥劑。收獲前要觀察病毒發(fā)病情況，及時(shí)拔去病株。收獲時(shí)嚴(yán)把質(zhì)量關(guān)，不符合質(zhì)量要求的薯塊堅(jiān)決不入窖。
原種和良種的繁育需要有500米的空間隔離帶(即500米內(nèi)無帶毒薯種植)和無病田塊，一般情況下，春季(4月上旬)引種1 000棵高級(jí)脫毒試管苗種采苗圃，到夏季(6月下旬)可利用防蟲網(wǎng)棚繁殖666.7平方米原原種，收獲原原種種薯1000-1500千克；第二年早春用原原種種薯育苗、速繁，在隔離條件下能繁殖100＊666.7平方米原種，收獲原種種薯100-200噸;第三年可繁殖5000＊666.7平方米良種；第四年可以供應(yīng)105＊666.7平方米以上大田生產(chǎn)用薯種。各地可以參考這一比例，再根據(jù)當(dāng)?shù)馗适碛缗c生產(chǎn)的技術(shù)水平加以適當(dāng)調(diào)整，以滿足當(dāng)?shù)厣a(chǎn)對(duì)脫毒甘薯種薯的需要。
在脫毒甘薯的擴(kuò)繁過程特別要注意防止病毒再侵染。具體措施有，加蓋40目防蟲棚、500米以上空間隔離、定期噴灑殺蚜蟲藥劑等。另外，繁育原原種和原種更好在3年以上未種過甘薯的生茬地，切匆在病(根腐病、線蟲病等)生產(chǎn)種薯。
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